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轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒是專為快速，敏感和特異的終點(diǎn)RT-PCR分析RNA（總RNA，mRNA，在體外轉(zhuǎn)錄的RNA，或病毒RNA）基因的特異性引物。特色該套件結(jié)合了創(chuàng)新的反應(yīng)緩沖液，敏感的，高收益的反轉(zhuǎn)錄的熱啟動(dòng)系統(tǒng)的高度，高收益的各種模板，包括富含GC-RNA擴(kuò)增性能的提高。該套件提供了一個(gè)方便的，高度敏感的兩步法RT-PCR方法產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄6.5 kb的應(yīng)用，如：

• 定性，半定量或定量分析，RNA轉(zhuǎn)錄水平
• 確定RNA模板的存在或不存在
• 量化分析，通過RNA基因表達(dá)（例如，病毒水平定量）
• 6.5 kb的克隆RNA

一步驟的格式是方便，降低反應(yīng)對(duì)反應(yīng)的變異性，并通過小化的手的步驟防止污染。

• 在很寬的放大范圍內(nèi)獲得高的靈敏度和產(chǎn)量：
  檢測低至1 fg的總RNA （圖1和圖2）。
• 實(shí)現(xiàn)高特異性和減少引物二聚體：
  優(yōu)異的性能，計(jì)數(shù)套件的專有的熱啟動(dòng)緩沖（申請中，圖2）。
• 產(chǎn)生長片段：
  生成多6.5 kb的（圖3）的轉(zhuǎn)錄。
• 抄寫各種模板，即使是困難的（例如，富含GC-RNA）：
  克服高二級(jí)結(jié)構(gòu)與熱穩(wěn)定性轉(zhuǎn)錄因子逆轉(zhuǎn)錄酶 在一個(gè)優(yōu)化的緩沖器（圖1）的結(jié)合。
• 節(jié)省時(shí)間和提高的結(jié)果：一個(gè)方便的工具包
  。
• 保護(hù)您的RNA樣品：
  保護(hù)您的RNA核糖核酸酶降解所提供的耐高溫保護(hù)功能的核糖核酸酶抑制劑，是在一步法RT-PCR時(shí)，其他的RNA酶抑制劑失敗。
• 在搜索結(jié)果中增加信心：
  使用所提供的控制反應(yīng)監(jiān)測性能。

轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒提供了一個(gè)兩步法RT-PCR（引物和模板除外）中的一種方便的格式所需的所有組件。的50-反應(yīng)包大小還包括10控制反應(yīng)控制RNA和控制的引物組合。
該套件的RT-PCR酶混合包含4不同的酶轉(zhuǎn)錄因子的反轉(zhuǎn)錄酶確保敏感和強(qiáng)大的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量高，保護(hù)RNA酶抑制劑，充分活躍在升高的溫度下，提供了大的模板保護(hù)反轉(zhuǎn)錄過程中;和展開系統(tǒng)-組成的共混物中的Taq DNA聚合酶和校對(duì)聚合酶-突變的可能性減至小，在PCR中提供高產(chǎn)率和高的保真度。
優(yōu)化的RT-PCR檢測反應(yīng)緩沖液，包括高品質(zhì)的dNTPs和熱啟動(dòng)系統(tǒng)提供了全面的改進(jìn)性能。該緩沖區(qū)的*的熱啟動(dòng)組件結(jié)合和隔絕引物在較低的溫度下，以防止從結(jié)合非特異性的引物。另一個(gè)組件結(jié)合的鎂，在溫度依賴性，以防止不受控制的DNA合成。這種新的緩沖制劑是有效的反轉(zhuǎn)錄過程中以及作為PCR，從而導(dǎo)致增加的特異性和靈敏度。
優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液和酶混合物的組合確保困難的模板與高的二級(jí)結(jié)構(gòu)和GC含量不增加反應(yīng)溫度的情況下的有效轉(zhuǎn)錄。

一步法RT-PCR是一種非常靈敏的技術(shù)，用于確定存在或不存在的RNA模板，或量化的表達(dá)水平，通過定性，半定量或定量分析的RNA轉(zhuǎn)錄水平（例如，病毒級(jí)量化）。此RT-PCR方法也有利于罕見消息用于克隆的擴(kuò)增。一步驟的格式是方便，示出降低反應(yīng)的反應(yīng)的變異性，并通過小化的手的步驟防止污染。
單步RT-PCR試 ??劑盒的轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄因子逆轉(zhuǎn)錄酶提供了突出的優(yōu)點(diǎn)，以及優(yōu)點(diǎn)熱啟動(dòng)一步法RT-PCR格式。

圖2：實(shí)現(xiàn)高靈敏度和特異性的轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒。
人的28S核糖體（A） A 389 bp的DNA段的 擴(kuò)增與轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT- PCR試 ??劑盒一步法RT-PCR試 ??劑盒從其他供應(yīng)商，制造商建議的反應(yīng)條件。結(jié)果表明，該轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒有效地放大了廣泛的樣品量具有更高的靈敏度和特異性，相比其他供應(yīng)商的工具包。

（A）


（B）



圖3：  產(chǎn)生片段6.5 KB。
各種金額的全部或病毒RNA反轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒使用在包插入反應(yīng)條件。樣品：10 ⁶份A型肝炎病毒（HAV）264 bp的DNA段RNA（）; 10 ng的總RNA不同組織類型或K-562細(xì)胞（139基點(diǎn)，387個(gè)基點(diǎn)，597基點(diǎn)和1.8 kb的片段），100 ng的總RNA不同組織類型或HeLa細(xì)胞（約2.5 kb，3.6 kb的，5.3 KB 6.0 KB，和6.3 kb片段）。結(jié)果表明，有效地轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒廣泛的片段大小。