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轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試劑盒


轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒是專為快速,敏感和特異的終點RT-PCR分析RNA(總RNA,mRNA,在體外轉(zhuǎn)錄的

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產(chǎn)品簡介:

 

應(yīng)用

轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒是專為快速,敏感和特異的終點RT-PCR分析RNA(總RNA,mRNA,在體外轉(zhuǎn)錄的RNA,或病毒RNA)基因的特異性引物。特色該套件結(jié)合了創(chuàng)新的反應(yīng)緩沖液,敏感的,高收益的反轉(zhuǎn)錄的熱啟動系統(tǒng)的高度,高收益的各種模板,包括富含GC-RNA擴增性能的提高。該套件提供了一個方便的,高度敏感的兩步法RT-PCR方法產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄6.5 kb的應(yīng)用,如:




  • 定性,半定量或定量分析,RNA轉(zhuǎn)錄水平
  • 確定RNA模板的存在或不存在
  • 量化分析,通過RNA基因表達(例如,病毒水平定量)
  • 6.5 kb的克隆RNA

一步驟的格式是方便,降低反應(yīng)對反應(yīng)的變異性,并通過小化的手的步驟防止污染。

 

優(yōu)點

    • 在很寬的放大范圍內(nèi)獲得高的靈敏度和產(chǎn)量:
      檢測低至1 fg的總RNA (圖1和圖2)。
    • 實現(xiàn)高特異性和減少引物二聚體:
      優(yōu)異的性能,計數(shù)套件的專有的熱啟動緩沖(申請中,圖2)。
    • 產(chǎn)生長片段:
      生成多6.5 kb的(圖3)的轉(zhuǎn)錄。
    • 抄寫各種模板,即使是困難的(例如,富含GC-RNA):
      克服高二級結(jié)構(gòu)與熱穩(wěn)定性轉(zhuǎn)錄因子逆轉(zhuǎn)錄酶 在一個優(yōu)化的緩沖器(圖1)的結(jié)合。
    • 節(jié)省時間和提高的結(jié)果一個方便的工具包
      。
    • 保護您的RNA樣品:
      保護您的RNA核糖核酸酶降解所提供的耐高溫保護功能的核糖核酸酶抑制劑,是在一步法RT-PCR時,其他的RNA酶抑制劑失敗。
    • 在搜索結(jié)果中增加信心:
      使用所提供的控制反應(yīng)監(jiān)測性能。

 

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產(chǎn)品明細:

 

產(chǎn)品描述

轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒提供了一個兩步法RT-PCR(引物和模板除外)中的一種方便的格式所需的所有組件。的50-反應(yīng)包大小還包括10控制反應(yīng)控制RNA和控制的引物組合。
該套件的RT-PCR酶混合包含4不同的酶轉(zhuǎn)錄因子的反轉(zhuǎn)錄酶確保敏感和強大的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量高,保護RNA酶抑制劑,充分活躍在升高的溫度下,提供了大的模板保護反轉(zhuǎn)錄過程中;和展開系統(tǒng)-組成的共混物中的Taq DNA聚合酶和校對聚合酶-突變的可能性減至小,在PCR中提供高產(chǎn)率和高的保真度。
優(yōu)化的RT-PCR檢測反應(yīng)緩沖液,包括高品質(zhì)的dNTPs和熱啟動系統(tǒng)提供了全面的改進性能。該緩沖區(qū)的*的熱啟動組件結(jié)合和隔絕引物在較低的溫度下,以防止從結(jié)合非特異性的引物。另一個組件結(jié)合的鎂,在溫度依賴性,以防止不受控制的DNA合成。這種新的緩沖制劑是有效的反轉(zhuǎn)錄過程中以及作為PCR,從而導(dǎo)致增加的特異性和靈敏度。
優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液和酶混合物的組合確保困難的模板與高的二級結(jié)構(gòu)和GC含量不增加反應(yīng)溫度的情況下的有效轉(zhuǎn)錄。

 

背景資料

一步法RT-PCR是一種非常靈敏的技術(shù),用于確定存在或不存在的RNA模板,或量化的表達水平,通過定性,半定量或定量分析的RNA轉(zhuǎn)錄水平(例如,病毒級量化)。此RT-PCR方法也有利于罕見消息用于克隆的擴增。一步驟的格式是方便,示出降低反應(yīng)的反應(yīng)的變異性,并通過小化的手的步驟防止污染。
單步RT-PCR試 ??劑盒的轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄因子逆轉(zhuǎn)錄酶提供了突出的優(yōu)點,以及優(yōu)點熱啟動一步法RT-PCR格式。

 

內(nèi)容

  1. RT-PCR酶混合物,其中包含轉(zhuǎn)錄因子逆轉(zhuǎn)錄酶,RNA酶抑制劑保護,并展開系統(tǒng)
  2. RT-PCR方法包含熱啟動,中介部件和dNTPs - 5倍濃縮的反應(yīng)緩沖液
  3. 水,PCR-級
  4. 控制RNA - HAV RNA,體外成績單*
  5. 控制引物組合的HAV RNA(正向和反向引物)*

*僅包括包裝大小在50-反應(yīng)。
 

 

典型的實驗

圖1:轉(zhuǎn)錄困難模板,靈敏度高。
(A)的 各種金額(1 FG)的HeLa細胞總RNA反轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒。A 389 bp的DNA段(GC含量為64%),與人28S核糖體RNA的特異性引物進行擴增,根據(jù)標準的RT-PCR方法的試劑盒的協(xié)議(反轉(zhuǎn)錄,在50℃,30分鐘)。通過瓊脂糖凝膠電泳和溴化乙錠染色后,得到的清晰可見波段所示,該試劑盒轉(zhuǎn)錄甚至少量(1蛋白原)的模板,以高靈敏度
(B)的 RT-PCR法進行系列稀釋的A型肝炎病毒( HAV)RNA(體外成績單)作為一個模型系統(tǒng)。甲246 bp的片段擴增,根據(jù)標準的RT-PCR方法的試劑盒的協(xié)議(反轉(zhuǎn)錄,在50℃,30分鐘)。所示的瓊脂糖凝膠電泳和溴化乙錠染色后獲得清晰的可見光波段,該套件具有很高的靈敏度,即使是低拷貝數(shù)轉(zhuǎn)錄的模板(1份)。


(A)



(B)

圖2:實現(xiàn)高靈敏度和特異性的轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒。
人的28S核糖體(A) A 389 bp的DNA段的 擴增與轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT- PCR試 ??劑盒一步法RT-PCR試 ??劑盒從其他供應(yīng)商,制造商建議的反應(yīng)條件。結(jié)果表明,該轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒有效地放大了廣泛的樣品量具有更高的靈敏度和特異性,相比其他供應(yīng)商的工具包。

(A)



(B)



圖3:  產(chǎn)生片段6.5 KB。
各種金額的全部或病毒RNA反轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒使用在包插入反應(yīng)條件。樣品:10 6份A型肝炎病毒(HAV)264 bp的DNA段RNA(); 10 ng的總RNA不同組織類型或K-562細胞(139基點,387個基點,597基點和1.8 kb的片段),100 ng的總RNA不同組織類型或HeLa細胞(約2.5 kb,3.6 kb的,5.3 KB 6.0 KB,和6.3 kb片段)。結(jié)果表明,有效地轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒廣泛的片段大小。


 

 

 

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上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實驗耗材、自產(chǎn)分子生物學產(chǎn)品為一體,并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承以客戶為中心,以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。

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