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上海索宝生物科技有限公司

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了解D-虫荧光素钾盐的使用方法

阅读:132      发布时间:2025-7-23
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D-虫荧光素(D-Luciferin)是萤火虫荧光素酶底物,其量子效率为0.88,是Luminol的20倍。反应原理:首先,在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用,用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。


应用:

(1) 体外分析

(2) 活体成像分析

(3) 高灵敏度ATP分析


使用方法:

1. 活体成像分析方法

(1) 用DPBS(w/o Mg2+ 、Ca2+ )配置D-Luciferin工作液(15mg/mL,超声助溶)* ,0.2 μm滤膜无菌过滤。

(2) 注射量:10μL/g的体重,如10g 重小鼠,注射100μL 工作液(1.5 mg D-Luciferin)。

(3) 腹腔注射10~15分钟后,上机进行图像分析。

2. 体外分析方法

(1) 用无菌水配置200× 的D-Luciferin储备液(30mg/mL,超声助溶)*,立即使用,或-20℃保存。

(2) 用预热好的充分培养基1∶200稀释D-Luciferin储备液,配置工作液(150μg/mL)。

(3) 去除培养细胞的培养基。

(4) 进行图像分析前,向细胞中添加1× 的D-Luciferin工作液,进行图像分析**。

(5):溶解D-Luciferin时要充分。

(6):在图像分析前,将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度。


相关产品:

D-虫荧光素游离酸(D-Luciferin, free acid)、D-虫荧光素钾盐(D-Luciferin, potassium salt)和D-虫荧光素钠盐(D-Luciferin, sodium salt),钾盐、钠盐的形式是通用的,因为它们都易溶于水。钾盐也是活体动物检测使用的主要形式。它们的激发和发射波长分别为328nm和533nm。

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