速率散射比濁法檢測(cè)補(bǔ)體C₃、C₄

    補(bǔ)體（complement，C）是由近20種不同血清蛋白組成的多分子系統(tǒng)，約占血清球蛋白總量的10％。補(bǔ)體在血清中的含量相對(duì)穩(wěn)定，不因免疫應(yīng)答而增加，僅在某些病理情況下才會(huì)發(fā)生波動(dòng)。補(bǔ)體系統(tǒng)的基本組成包括9種血清蛋白成分，按發(fā)現(xiàn)的先后順序而分別命名為C_1-9。補(bǔ)體是一個(gè)復(fù)雜的反應(yīng)系統(tǒng)，除了溶解細(xì)胞和協(xié)助殺菌作用外，還可促進(jìn)炎癥反應(yīng)，與其他生物活性系統(tǒng)有相互促進(jìn)、相互制約的關(guān)系，這些關(guān)系的紊亂是導(dǎo)致許多疾病損傷的物質(zhì)基礎(chǔ)。C₃是一種β球蛋白，是補(bǔ)體中含量zui多、作用zui重要的一個(gè)組分，是補(bǔ)體兩條主要激活途徑的中心環(huán)節(jié)，有重要的生物活性作用，可在肝臟中產(chǎn)生。C₄是由肝臟、巨噬細(xì)胞合成的，參與經(jīng)典激活途徑，是補(bǔ)體中含量?jī)H低于C₃的重要組分。常用檢測(cè)方法為速率透射比濁法、速率散射比濁法等。

    [檢測(cè)方法]  速率散射比濁法

    [方法學(xué)原理]  抗原（C₃、C₄）與抗體（抗C₃、抗C₄）在液相中可快速反應(yīng)，形成的免疫復(fù)合物顆粒具有特殊的光學(xué)特性，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。速率是指單位時(shí)間內(nèi)抗原、抗體形成免疫復(fù)合物的速度。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)免疫復(fù)合物總量是逐漸增加的，而速率變化為慢+快一慢，其反應(yīng)速率zui快的某一時(shí)間稱(chēng)為速率峰。當(dāng)反應(yīng)體系中的抗體量過(guò)剩時(shí)，速率峰的高低只與C₃、C₄含量成正比，儀器將測(cè)得的速率峰值通過(guò)對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的C₃、C₄濃度。

    [標(biāo)本準(zhǔn)備]  空腹靜脈血2ml，不抗凝。

    [試劑]  免疫比濁儀配套C3、C4試劑盒，內(nèi)含有稀釋液、緩沖液、抗血清等，按說(shuō)明書(shū)配制。

    [儀器]  全自動(dòng)特種蛋白分析儀。

    [檢測(cè)步驟]

    1．標(biāo)本處理，3 500rpm離心lOmin，分離血清。

    2．根據(jù)操作程序進(jìn)行樣品測(cè)定：

    （1）輸入杯號(hào)；

    （2）選擇所測(cè)項(xiàng)目C3、C4；

    （3）存盤(pán)；   

    （4）編程完畢后，將標(biāo)本放人標(biāo)本杯中，且放入標(biāo)本盤(pán)中相應(yīng)位置，將所做項(xiàng)目的試劑放人試劑盤(pán)中相應(yīng)位置，確認(rèn)無(wú)誤后，開(kāi)始運(yùn)行特種蛋白分析儀。

    [正常參考值]  C3：0．8～1．55g／L5C4：0．12～0．36g／L。   

    [注意事項(xiàng)]

    1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)置室溫環(huán)境中平衡。   

    2．試劑瓶蓋打開(kāi)時(shí)應(yīng)注意打破瓶口的液膜，以防液感儀感應(yīng)錯(cuò)誤。

    3．血清中若含有脂類(lèi)應(yīng)高速離心分離脂質(zhì)，防止假濁度產(chǎn)生。

    [臨床意義]  在感染性疾病中，急性感染期可見(jiàn)C3、C4增高。由于補(bǔ)體在肝細(xì)胞中合成，所以重癥病毒性肝炎、慢性病毒性肝炎，特別是轉(zhuǎn)化為肝硬化后，C3、C4水平均下降。

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