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上海聯(lián)碩生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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關(guān)于細(xì)胞因子ELISA試劑盒的試驗(yàn)條件

時(shí)間:2023/8/30閱讀:708
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細(xì)胞因子ELISA試劑盒液體類(lèi)標(biāo)本: 包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

血清: 
室溫血液自然凝結(jié)10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積形成,應(yīng)再次離心。 

血漿: 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積形成,應(yīng)再次離心。

尿液: 用無(wú)菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

細(xì)胞培養(yǎng)上清: 檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管搜集。


ELISA試劑盒的試驗(yàn)條件如下:
    
1、固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯yi烯、聚苯y(tǒng)i烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。 
    
2、包被抗體或抗原的挑選:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。
    
3、 酶符號(hào)抗體作業(yè)濃度的挑選:首先用直接ELISA法進(jìn)行開(kāi)始效價(jià)的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法",在正式試驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其作業(yè)濃度。
    
4、酶的底物及供氫體的挑選:對(duì)供氫體的挑選要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而自身無(wú)色。有些供氫體有潛在的致癌作用,細(xì)胞因子ELISA試劑盒應(yīng)留意防護(hù)

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