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北京西美杰科技有限公司
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德国Applichem品牌RNaseA(a2760)
2015-3-17 阅读(328)
西美杰*代理Applichem品牌RNaseA(a2760)
英文名称:Ribonuclease A
核糖核酸酶A(RNase A) 来源:牛胰腺。
分子量:13.7kD
CAS:9001-99-4
外观:类白色结晶或冻干粉
特性:类型:Type I-A 活性:70u/mg protein
鉴定:约70% as RNase A (SDS-PAGE)
制备不含DNase的RNase:将RNase A溶解在0.01M的醋酸钠(pH5.2)中,使终浓度为10mg/ml,加热到100℃,15min,在室温下缓慢冷却。用0.1体积的1M的 Tris-cl调整PH pH至7.4后,分装小管保存在-20℃备用,当浓缩的溶液在中性pH条件下加热到100度时,核糖核酸酶产生沉淀。
活性:在25°C和pH值5.0条件下,活性被定义为一个单位的酶量导致RNA产生的水解速度常数,k = 1
储存:-20℃
Applichem RNase A是一种被详细研究和具有广泛应用的核酸内切酶.RNase A 对RNA有水解作用,但对DNA则不起作用。RNase A在C端和U端残基处专一地催化RNA的核糖部分3'-与5' -磷酸二酯键的裂开,形成具有 2',3'-环磷酸衍生物寡聚核苷酸。如 pG-pG-pC-pA-pG 被切割产生pG-pG-pCp 和 A-pG??梢杂美慈コ鼶NA制品中的污染RNA。
主要用于生化研究,测定核酸的结构 · RNase 保护检测 · 去除非特异结合的RNA · 分析RNA 序列 · 水解蛋白样品中的RNA · 纯化DNA 此外,它具有显著的细胞毒性,可以杀灭许多肿瘤细胞系,可以抑制导致艾滋病的HIV-1病毒在细胞中的复制,可以治疗乙肝。西美杰代理applichem (1)从DNA-RNA或RNA—RNA杂合体中去除未杂合的RNA区?! ?2)确定DNA或RNA中单碱基突变的位置(Myers et al.1985,Winter et al.1985)。 在此方法中,RNA-DNA或RNA-RNA杂合体上的单碱基错配可被RNA酶A识别并切割。利用含SP5或T7噬菌体启动子的质粒,在体外合成与野生型DNA或RNA互补的32p标记RNA探针,然后与待检含单碱基置换的DNA或RNA退火, 所产生的单碱基错配可用RNA酶A切割,通过凝胶电泳分析切割产物的大小即可确定错配的位置。
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文献:
(1) Ausubel, F.A., Brent, R., Kingston, R.E., Moore, D.D., Seidman, J.G., Smith, J.A. & Struhl, K. (eds.) (1995) Current Protocols in Molecular Biology. Page 3.13.1 Suppl. 8; Greene Publishing & Wiley-Interscience, New York
(2) Sambrook, J. & Russel, D.W. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd Edition Page A4.39. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York.
(3) Melton, D.A. et al. (1984) Nucleic Acids Res. 12, 7035-7056
Efficient in vitro synthesis of biologically active RNA and RNA hybridization probes from plasmids containing the SP6 promoter.
(4) Winter, E. et al. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 7575-7579
A method to detect and characterize point mutations in transcribed genes.