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2016年ELISA試劑盒試驗效應(yīng)邊緣問題

時間:2016/12/26閱讀:1417
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咱們在運(yùn)用ELISA試劑盒96孔板的試驗測定的時分,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",也就是外周孔顯色較基地孔深。經(jīng)研討證真實溫育中的熱力學(xué)梯度也許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在試驗室的常規(guī)ELISA測定中,將板從室溫(一般在25℃分配)置于37℃溫箱,板也升溫時,在外周孔與基地孔之間也許存在一熱力學(xué)梯度。因而運(yùn)用水浴或在將反響溶液參加至板孔中時,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地打掃“邊緣效應(yīng)",并且可提高測定的重復(fù)性。 
ELISA試劑盒還有就是在試驗中,必定有運(yùn)用微量加樣器參加樣本的步驟。提醒留神:加樣不行太快,要防止加在孔壁上部,不行濺起和發(fā)生氣泡。ELISA試劑盒太快的話無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易致使非特異吸附。濺起會對鄰近孔發(fā)生污染。出現(xiàn)氣泡則反響液界面有區(qū)別。所以,有時分一份標(biāo)本用一樣的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,一般就是上述加樣及試劑的差錯所構(gòu)成的。
ELISA試劑盒運(yùn)用時必定要根據(jù)自個的試驗需求收購獲取試劑盒,假設(shè)不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能保證其質(zhì)量以及完整性。

 

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