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高速逆流色譜儀技術的發(fā)展歷程
閱讀：1933發(fā)布時間：2017-7-6
高速逆流色譜儀技術的發(fā)展歷程
高速逆流色譜法是建立在單向性流體動力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法，它是在研究旋轉管的流體動力平衡時偶然發(fā)現(xiàn)的。當螺旋管在慢速轉動時，螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端。用某一相作移動相從一端向另一端洗脫時，另一相在螺旋管里的保留值大約50%，但這一保留量會隨著移動相流速的增大而減小，使分離效率降低。但使螺旋管的轉速加快時，兩相的分布發(fā)生變化。當轉速達到臨界范圍時，兩相就會沿螺旋管長度*分開，其中一相全部占據(jù)首端的一段，我們稱這一相為首端相，另一段全部占據(jù)尾端的一段，稱為尾端相。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征，在高的螺旋管轉動速下，如果從尾端送入首端相，它將穿過尾端相而移向首端，同樣，如果從首端相送入尾相，它將穿過首端相而移向螺旋管的尾端。分離時，在螺旋管內(nèi)首先注入其中的一相(固定相)，然后從合適的一端泵入移動相，讓它載著樣品在螺旋管中無限次的分配。儀器轉速越快，固定相保留越多，分離效果越好，且大大地提高了分離速度，故稱高速逆流色譜。
高速逆流色譜 （ high-speed countercurrent chromatography ， HSCCC ）是 20 世紀 80 年代發(fā)展起來的一種連續(xù)的液—液分配色譜分離技術， 它不用任何固態(tài)的支撐物或載體。 它利用兩相溶劑體系在高速旋轉的螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單向性流體動力學平衡，當其中一相作為固定相，另一相作為流動相，在連續(xù)洗脫的過程中能保留大量固定相。
由于不需要固體支撐體，物質(zhì)的分離依據(jù)其在兩相中分配系數(shù)的不同而實現(xiàn)，因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等，不僅使樣品能夠全部回收，回收的樣品更能反映其本來的特性，特別適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質(zhì)與液態(tài)固定相之間能夠充分接觸，使得樣品的制備量大大提高，是一種理想的制備分離手段。
它相對于傳統(tǒng)的固—液柱色譜技術，具有適用范圍廣、操作靈活、、快速、制備量大、費用低等優(yōu)點。HSCCC 技術正在發(fā)展成為一種備受關注的新型分離純化技術，已經(jīng)廣泛應用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領域， 特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認為是一種有效的新型分離技 術；適合于中小分子類物質(zhì)的分離純化。
我國是繼美國、日本之后zui早開展逆流色譜應用的國家，俄羅斯、法國、英國、瑞士等國也都開展了此項研究。美國FDA食品和藥物管理局(Food and Drug Administration)及世界衛(wèi)生組織（ WHO ）都引用此項技術作為抗生素成分的分離檢定， 90 年代以來，高速逆流色譜被廣泛地應用于天然藥物成分的分離制備和分析檢定中。
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