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杭州瑞析科技有限公司
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關于液相色譜法的介紹

時間:2010-8-20閱讀:4000
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液相色譜法(HPLC)是20世紀60年代末70年代初發(fā)展起來的一種新型分離分析技術,隨著不斷改進與發(fā)展,目前已成為應用極為廣泛的化學分離分析的重要手段。它是在經典液相色譜基礎上,引入了氣相色譜的理論,在技術上采用了高壓泵、固定相和高靈敏度檢測器,因而具備速度快、效率高、靈敏度高、操作自動化的特點。為了更好地了解液相色譜法*性,現從兩方面進行比較:

 

1.液相色譜法與經典液相色譜法

液相色譜法比起經典液相色譜法的更大優(yōu)點在于高速、、高靈敏度、高自動化。高速是指在分析速度上比經典液相色譜法快數百倍。由于經典色譜是重力加料,流出速度極慢;而液相色譜配備了高壓輸液設備,流速更高可達 103cm·min-1.例如分離苯的羥基化合物,7個組分只需1min就可完成。對氨基酸分離,用經典色譜法,柱長約170cm,柱徑0.9cm,流動相速度為30cm3·h-1,需用20多小時才能分離出20種氨基酸;而用液相色譜法,只需lh之內即可完成。又如用25cm×0.46cmLichrosorbODS(5μ的柱,采用梯度洗脫,可在不到0.5h內分離出尿中104個組分.

 

2.液相色譜法與氣相色譜法

l)氣相色譜法分析對象只限于分析氣體和沸點較低的化合物,它們僅占有機物總數的20%。對于占有機物總數近80%的那些高沸點、熱穩(wěn)定性差、摩爾質量大的物質,目前主要采用液相色譜法進行分離和分析。

 (2)氣相色譜采用流動相是惰性氣體,它對組分沒有親和力,即不產生相互作用力,僅起運載作用。而液相色譜法中流動相可選用不同極性的液體,選擇余地大,它對組分可產生一定親和力,并參與固定相對組分作用的劇烈競爭。因此,流動相對分離起很大作用,相當于增加了一個控制和改進分離條件的參數,這為選擇更佳分離條件提供了極大方便。

(3)氣相色譜一般都在較高溫度下進行的,而液相色譜法則經??稍谑覝貤l件下工作。

      總之,液相色譜法是吸取了氣相色譜與經典液相色譜優(yōu)點,并用現代化手段加以改進,因此得到迅猛的發(fā)展。目前液相色譜法已被廣泛應用于分析對生物學和醫(yī)藥上有重大意義的大分子物質,例如蛋白質、核酸、氨基酸、多糖類、植物色素、高聚物、染料及藥物等物質的分離和分析。

       液相色譜法的儀器設備費用昂貴,操作嚴格,這是它的主要缺點。

 

 

本文出自:http://www.jssxkj.net

 

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