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關(guān)于液相離子交換色譜法的應(yīng)用

時(shí)間:2010-12-15閱讀:4356
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      離子交換色譜法在液相色譜的世界里廣泛應(yīng)用,發(fā)揮了巨大的作用。以下是關(guān)于液相色譜法中離子交換法的應(yīng)用:

    離子交換固定相的確研究過不少,如八十年代初流行的TSKSW硅膠及基于二乙胺乙基(DEAE) 制成的陰離子交換材料用于蛋白質(zhì)及核酸的優(yōu)化分離,低聚糖的分離采用Micro-Pak AX-5。XAD 樹脂是色譜中使用更基本的固定相,弱酸、弱堿及兩性電解質(zhì)的分離均有人研究過,反離子以擴(kuò)散雙電層形式存在。也有人制備多孔甲基丙烯酸鹽離子交換劑,但多數(shù)人愿意使用商品化的交換劑。Sevec Frechet [5] 制得聚甲基丙烯酸縮水甘油酯共聚二甲基乙烯丙烯酸酯色譜柱 (300×8 mm) 用于蛋白質(zhì)離子交換的制備色譜。他們能做到一次進(jìn)樣到這種色譜柱分離300mg 的蛋白質(zhì)混合物。Gawdzrk  Matynia制備了一種交聯(lián)的(p,p’—二羥基苯—丙烷二環(huán)氧甘油醚和二乙烯苯的甲基丙烯酸酯的多孔共聚物作為一種更新的HPLC填料并且評價(jià)了其作為正相和反相分離的效果。 Danielson 和其合作者[6] 用一種丙胺基硅基質(zhì)同Kel-F800 反應(yīng)制得一種弱陰離子交換填料。

1.5 空間排阻色譜 Kato 等曾通過丁醚或三乙醇苯醚與TSK G3000 SW 空間排阻色譜法 (SEC) 結(jié)合合成 HIC 固定相材料,當(dāng)使用鹽溶液梯度洗脫時(shí),可達(dá)到很高的分離度。一些極性鍵合相通過分配比調(diào)節(jié)的排阻色譜分離蛋白質(zhì)和多肽。Miller 等報(bào)道過用醚相結(jié)構(gòu)合成大孔硅膠填料:Si-(CH2)3-O-(CH2CH2O)n-R;n=1,23;R=Me,Etn-Bu。用這種填料制得的色譜柱可至少連續(xù)使用五個(gè)月其保留值不變。
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