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凝膠成像系統(tǒng)常見(jiàn)的測(cè)量應(yīng)用
閱讀：1386 發(fā)布時(shí)間：2020-12-18
凝膠成像系統(tǒng)：對(duì)蛋白質(zhì)或核酸凝膠進(jìn)行觀察、成像的實(shí)驗(yàn)儀器，并可進(jìn)行分子量計(jì)算、含量計(jì)算、密度分析等半定量分析。
總體上來(lái)說(shuō)凝膠成像可應(yīng)用于：凝膠成像系統(tǒng)可以用于：蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析。
凝膠成像系統(tǒng)的常見(jiàn)的測(cè)量應(yīng)用：
（1）分子量定量
對(duì)于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過(guò)對(duì)膠上DNAMarker條帶的已知分子量注釋,自動(dòng)生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過(guò)這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。
?。?）密度定量
一般常用的測(cè)定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶，根據(jù)與已知條帶的密度做比較，可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對(duì)PAGE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。
?。?）密度掃描
在分子生物學(xué)和生物工程研究中,常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項(xiàng)工作。
?。?）PCR定量
PCR定量主要是指，如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是一條，那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對(duì)百分?jǐn)?shù)。就此功能而言，與密度掃描類似，但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù)，密度掃描時(shí)并對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。
上海培清化學(xué)發(fā)光凝膠成像可對(duì)對(duì)ECL發(fā)光等直接曝光成像，并獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果。以往實(shí)驗(yàn)室主要使用暗室曝光壓片進(jìn)行ECL檢測(cè)，但建造暗室成本高而且浪費(fèi)實(shí)驗(yàn)室空間，曝光步驟繁瑣，沖洗X膠片時(shí)還會(huì)接觸到有毒的化學(xué)試劑?；瘜W(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)的使用已經(jīng)逐漸取代傳統(tǒng)的暗室壓片曝光檢測(cè)。