化工仪器网
技术文章
菌落总数测试片检测方法
阅读：2990 发布时间：2017-12-12 方法原理：将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑(TTC)显色剂等加载在试纸片，经加样、培养后，细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑，通过计数报告结果。
检测方法：
1.样品处理：无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，经充分振摇(均质)做成1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。以此类推，做出1:1000等稀释度的稀释液，每个稀释度更换一支灭菌吸管。
2.接种：一般食品选2～3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到中央的纸片上，轻轻将上盖膜放下，静置5 min使培养基凝固，zui后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。
3.培 养：将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。
4.结果判断与计数：
细菌在纸片上生长后会显示红色斑点，选择菌落数适中(10个～100个)的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时，按实有数报告。大于100时，用二位有效数字，二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法计算，并以10的指数来表示。
注意事项：使用过的纸片上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。