上海美析儀器有限公司
超氧化物岐化酶(SOD)的應(yīng)用方案
檢測(cè)樣品：酶
檢測(cè)項(xiàng)目：活性
方案概述：SOD是含金屬輔基的酶。高等植物含有兩種類型的SOD:Mn-SOD和Cu.Zn-SOD，它們都催化下列反應(yīng):由于超氧自由基(02)為不穩(wěn)定自由基，壽命極短，測(cè)定SOD活性一般為間接方法。并利用各種呈色反應(yīng)來測(cè)定SOD的活力。核黃素在有氧條件下能產(chǎn)生超氧自由基負(fù)離子02-..-，當(dāng)加入NBT后，在光照條件下，與超氧自由基反應(yīng)生成單甲躦(黃色)，繼而還原生成二甲躦……
引言：
SOD是含金屬輔基的酶。高等植物含有兩種類型的SOD:Mn-SOD和Cu.Zn-SOD，它們都催化下列反應(yīng):由于超氧自由基(02)為不穩(wěn)定自由基，壽命極短，測(cè)定SOD活性一般為間接方法。并利用各種呈色反應(yīng)來測(cè)定SOD的活力。核黃素在有氧條件下能產(chǎn)生超氧自由基負(fù)離子02-..-，當(dāng)加入NBT后，在光照條件下，與超氧自由基反應(yīng)生成單甲躦(黃色)，繼而還原生成二甲躦，它是一種藍(lán)色物質(zhì)，在560nm波長下有最大吸收。當(dāng)加入SOD時(shí)，可以使超氧自由基與H結(jié)合生成H2O2和02，從而抑制了NBT光還原的進(jìn)行，使藍(lán)色二甲攢生成速度減慢。通過在反應(yīng)液中加入不同量的SOD酶液，光照--定時(shí)間后測(cè)定560nm波長下各液光密度值，抑制NBT光還原相對(duì)百分率與酶活性在一定范圍內(nèi)呈正比。反應(yīng)液藍(lán)色愈深，說明酶活性愈低。
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