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用于去除 GST 标签的 PreScission 蛋白酶

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 于Cytiva(思拓凡)

Cytiva(思拓凡) 和 Pall(颇尔)生命科学业务合并,携手共同为研究人员和生物制药企业提供广泛多元的产品组合和专业的技术支持与服务,推动创新疗法从研发到商业化的发展。全新的Cytiva全面助力客户提升工作质量、速度与安全性,赋能创新型药物的开发和生产,惠及全球患者。合并后,Cytiva的产品品牌包括Allegro™,Supor™,iCELLis™ 和 Kleenpak™,以及ÄKTA™,Amersham™,Biacore™,FlexFactory™,HyClone™,MabSelect™,Sefia™,Whatman™ 和 Xcellerex™。

生命科学

PreScission 蛋白酶是人鼻病毒 (HRV) 3C 蛋白酶和 GST 的融合蛋白??梢徊酵瓿?GST 标签的层析柱上裂解和蛋白纯化。
  • 识别 LeuGluValLeuPheGln/GlyPro 序列并在Gln 残基与 Gly 残基之间进行特异性酶切。
  • 省时——可以酶切 GST 标签蛋白,同时仍与亲和层析填料结合。
  • 孵育温度低——能够低温酶切包含 HRV 3C 蛋白酶识别序列的融合蛋白。

层析柱上或层析柱外酶裂解

当融合蛋白仍与 Glutathione Sepharose 4B、Glutathione Sepharose High Performance 或 Glutathione Sepharose 4 Fast Flow 亲和层析填料结合时,只需一步即可去除 GST 标签和蛋白酶。另一个选择是使用还原型洗脱带 GST 标签的蛋白质,裂解,然后使样品通过相同的层析填料以去除蛋白酶和标签。

与其他常规蛋白酶(例如和 Xa 因子)不同,这种带 GST 标签的融合蛋白可以通过结合对 GST 具有亲和力的层析填料而轻松去除。其他非重组蛋白质酶需要使用不同的层析填料进行额外的纯化步骤。

编码 HRV 3C 蛋白酶识别序列的载体

pGEX-6P 载体 pGEX-6P-1、pGEX-6P-2 和 pGEX-6P-3 编码此 3C 蛋白酶的识别序列。

成功用于已发表研究

PreScission 蛋白酶在多种研究应用中用于执行酶切,包括:

  • 泛素化蛋白中所涉及蛋白的层析柱上裂解和纯化
  • 从包涵体中对带 GST 标签的蛋白质进行裂解和纯化,用以研究丙型肝炎病毒离子通道复合物的形成


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