EA.hy926人臍靜脈細胞融合細胞
背景描述在PEG脅迫下，將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細胞與抗硫鳥嘌呤的A549克隆株融合，構建了人臍靜脈細胞株, EA.hy926。融合子在HAT培養(yǎng)基上生長并以八因子相關抗原篩選。EA.hy926已經過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示Weibel-Palade小體的細胞質分布以及組織特異性的細胞器，分化的內皮細胞特性如血管生成，體內平衡/血栓形成，血壓及炎癥反應。 [PubMed: 6407019]
培養(yǎng)條件準備DMEM (含NaHCO3 1.5g/L）培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；雙抗1%。
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
細胞特征來源：體細胞融合細胞
形態(tài)：內皮細胞樣，貼壁生長
凍存條件無血清凍存液。
細胞檢測不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
供應限制僅供科研使用
運輸方式常溫或凍存（T25瓶或者1mL凍存管包裝）
注意事項細胞接收后的處理：
1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的專用培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
1）凍存細胞的復蘇：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，專用培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1.吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍，去PBS。加入0.25%胰酶2ml消化15秒，去胰酶。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱，靠殘余胰酶繼續(xù)消化細胞3-10分鐘直至細胞變圓（每3分鐘觀察一次。）
2.加12ml專用培養(yǎng)基，吹打均勻，即可分到2個T25培養(yǎng)瓶里。（細胞1傳2，若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板，建議先包被）
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例；
1.細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2.1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3.將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
上海語純生物科技有限公司，是由具有優(yōu)良生命科學、生物技術背景人員共同創(chuàng)辦的技術企業(yè)。公司專注于原代細胞、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關試劑產品，為高校、食品、醫(yī)藥、生物研究等領域提供相關技術支持和服務。
公司自成立以來通過不斷地科技創(chuàng)新，產品研發(fā)，已為客戶提供定制化細胞產品以及完整的細胞培養(yǎng)解決方案，通過積極地探索、研發(fā)、深化和豐富產品，目前基礎培養(yǎng)基產品種類多達200多種，細胞系300多種，原代細胞接近600種。我們始終以“發(fā)展科學技術，關愛公眾生命健康”為動力，通過技術創(chuàng)新，廣泛吸納高科技人才，不斷完善產品體系、豐富產品鏈，積極拓展市場，擴充應用領域，，建立了具有市場競爭力的“語純”品牌。
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3、本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療。
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