小鼠外周血来源内皮祖原代细胞
参考价 | ¥1-¥560/件 |
- 公司名称 上海研生实业有限公司
- 品牌上研生
- 型号
- 所在地上海市
- 厂商性质经销商
- 更新时间2025/5/20 12:08:34
- 访问次数 80
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供货周期 | 现货 | 规格 | 5×10? |
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货号 | YS-01X7578 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
主要用途 | 仅供科研实验 |
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
细胞属性:
方法简介
公司实验室分离的小鼠外周血来源内皮祖采用采集外周血、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的小鼠外周血来源内皮祖经CD34免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 小鼠外周血来源内皮祖原代细胞 | 组织来源 | 外周血 |
英文名称 | Mouse Peripheral Blood-Derived Endothelial Progenitor Cells | 货号 | YS-01X7578 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介:
小鼠外周血来源内皮祖细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞,亦称为成血管细胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞,缺乏成熟内皮细胞的特征性表型,不能形成管腔样结构,其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示,内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用,并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路,EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传1-2代;不建议多次传代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品:
人支气管上皮细胞总RNAHBEpiC NA | 肌醇单酸酶IMPA3抗体 |
节律蛋白2抗体 | 钙反应因子抗体 |
表皮生长因子抗体(人) | 小鼠血清白蛋白抗体 |
抑素B/半蛋白酶抑制剂B抗体 | 无胸腺症关键蛋白6样抗体(迪格奥尔格综合征) |
三号染色体开放阅读框抗体 | 二甲基化组蛋白H3抗体 |
ELK1 Others Human 人 ELK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) |
牛肾细胞;MDBK(BVDV-free) | CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) |
人表皮微血管内皮细胞(HDMEC)( 5×105 ) 人少突胶质细胞 Human | DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) |
CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人细胞裂解液 (阳性对照) | RAB27B Others Human 人 RAB27B 人细胞裂解液 (阳性对照) |
CM-H033人肠微血管内皮细胞培养基100mL | 小鼠外周血来源内皮祖原代细胞小鼠血清白蛋白抗体 |
NCF2 Others Human 人 NCF2 / NCF-2 / P67phox 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | WM35, 人黑色素瘤细胞 Human |
人成纤维细胞裂解物HMFL | METAP1 Others Human 人 METAP1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
RD细胞,人恶性胚胎横纹肌瘤细胞 屎肠球菌 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich | 酸化C端结合蛋白1抗体 |
14号染色体开放阅读框106抗体 | IGFBP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
肌动蛋白相关蛋白2/3亚型1A抗体 | 元衍生孤儿受体1抗体 |
锌指蛋白461抗体 | ELK1 Others Human 人 ELK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
操作步骤:
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。