革兰氏染色法是丹麦医生Christain Gram于1884年所发明，是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，亦是一种复染法，通过此法染色可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G⁺)和革兰阴性菌(G^-)两大类。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是肽聚糖层厚度和结构决定的，在同样染色环境中利用细菌不同的等电点(Gram阳性细菌等电点为pH2.0~3.0，Gram阴性细菌等电点为pH4.0~5.0)，阳性细菌带的负电荷比阴性细菌带的负电荷多，与带正电荷的碱性染料如结晶紫结合较牢，再加入媒染剂(碘)进入菌体后，与染料结合形成不溶于水的结晶紫-碘-蛋白复合物，并与阳性菌菌体内的核糖核酸镁盐结合，使已着色的细菌不易脱色；而分化剂(苯胺、丙酮等)不易透过阳性菌的细胞壁，故阳性菌不易退色；但分化剂容易进入阴性菌菌体内，溶解染料和碘复合物，使阴性菌脱色。

    Leagene 改良Gram-Weigert(苯胺结晶紫法)是在经典的革兰染色配方进行改进，使用苏木素和Weigert碘液加强染色，该法也是在草酸铵结晶紫法演化过来的；临床标本直接涂片，背景干净，胞内吞噬体清晰易辨认，细菌染色特征典型，可以区分Gram阳性细菌和阴性细菌，尤其适用于鉴别细菌和非细菌的蓝色微颗粒状物质(如钙盐)。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。