3D细胞培养物在生理上更相关，并且能更好地代表体内组织，可以更准确地预测药物治疗的功效或毒性。3D细胞模型越来越多地用于了解疾病机理和发现药物疗法。与2D培养相比，3D细胞培养可以更准确地预测药物治疗的功效或毒性。
         3D Luminescent Cell Viability Assay是一种基于荧光素酶系统的细胞活力检测试剂，借助ATP依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应，通过化学发光信号测定细胞内ATP含量，从而检测细胞活力。检测线性范围宽、灵敏度高、稳定性好。
        本试剂盒中由于高纯度的荧光素底物、热稳定的荧光素酶和经过优化的反应试剂，使得本产品具有更强的细胞裂解能力，可用于3D微组织培养的细胞活力分析。在细胞培养物中加入本产品使细胞团裂解，释放出ATP，即可产生如图所示的反应，发出稳定的光信号。发光强度与ATP的量，即活细胞数量在一定范围内成正比，因此本品可对活细胞数目进行定量检测。

产品特性：
3D Luminescent Cell Viability Assay检测灵敏度高、线性范围宽，可兼容少量样品检测以及大量样品的高通量筛选。
1、方便快速：试剂盒中提供的检测试剂为即用型，读数稳定，检测速度快，完成检测仅需约 10 分钟；
2、灵敏度高：应用于 3D 微组织检测具有更高的信噪比；
3、快速：添加试剂后可在 30min 或更短时间内记录数据；
4、发光信号更稳定：发光信号半衰期超稳定，通常＞3 小时。
5、裂解能力更强：经过优化的反应试剂具有更强的细胞裂解能力，适用于 3D 微组织培养的细胞活力分析；
6、高通量：可兼容少量样品检测以及大量样品的高通量筛选。

适用于生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖、细胞毒性试验等。

试剂准备：
1、试剂融化：实验前一天将试剂取出，置于 4℃过夜融化。也可在实验当天将试剂取出，置于室温融化，或放置于 22℃水浴融化，但需要注意水温不可超过 25℃。
2、平衡至室温：若试剂在非室温条件下融化，使用前可将其置于 22℃水浴，确保试剂平衡至室温后再用于检测。注：一般针对 5mL 包装需要约 10min；50mL 包装需要约 20min。
3、混匀：使用前轻柔颠倒 5 次使溶液混合均匀。
检测步骤：
1、 使用适合进行化学发光检测的 96 孔板，在其中加入含有细胞培养基的微组织。
注：（1）制备样品体积和微组织特性（例如，大小、数量、培养天数等）应针对实验条件进行优化；（2）样品的总 ATP 含量应保持在 10μM 以下（测定线性范围上限浓度）；（3）多孔板必须与使用的光度计兼容。
2、 将测试化合物添加到实验孔中，并根据您的培养方案进行孵育。
注：确保样品和测试化合物的体积足够低，以允许添加等体积的试剂，然后进行混合，而不会造成孔间污染。
3、 将板及其内容物平衡至室温(22-25℃)约 30 分钟。
4、 添加与每个孔中存在的细胞培养基体积相等的 3D Reagent 至检测孔中（例如，对于 96 孔板，将 100μl 3D Reagent 添加到 100μl 含有细胞的培养基中）。
5、 剧烈混合内容物 5 分钟以诱导细胞裂解。
注意：混合对于从 3D 微组织中有效提取 ATP 非常重要。
6、 让板在室温下再孵育 25分钟以稳定发光信号。
7、 记录发光。
注：板内不均匀的发光信号可能是由温度梯度、细胞接种不均匀或多孔板中的边缘效应引起的。

1、温度：试剂中含有荧光素酶，反复冻融会影响其活性。建议分装后置于-20℃避光保存。试剂及细胞样品使用前均需平衡至室温，以避免酶催化效果的影响；
2、化学因素：荧光素酶的反应速率和发光强度受化学环境影响。不同类型的培养基和血清中发光强度和衰减速率存在差异。另外，药物含量较高时可能会干扰荧光素酶反应，从而影响发光信号。建议设置含有药物的细胞培养液对照孔以排除溶剂的干扰;
3、光敏感：本试剂对光敏感，如果储存时暴露在光照下，会加快发光强度的衰减。如果试剂从原来的容器转移，请确保避光保存；
4、ATP污染：建议操作时佩戴口罩和乳胶手套，避免接触可能受到污染的表面和设备。操作时避免多次将枪头插入试剂瓶中。

1、低于-10℃避光保存。为保证最佳使用性能，长期存储时，建议置于-70℃。
2、本品反复冻融6个循环仍可保持稳定。
3、分装可能导致ATP污染风险，避免分装。