细胞名称：金仓鼠肾成纤维细胞；BHK21细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：

取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜*培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用12ml*培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，zui后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）待细胞*贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。

4、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含5ml*培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀用5ml*培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）第二天，换用新鲜*培养基继续培养。

原代细胞与细胞系有什么区别？细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，*次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞zui大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的*性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。

1、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。

2、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。

3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养？推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请的细胞培养专家。

售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。

YS4437C人脑胶质瘤细胞Hs 683

YS4438C小鼠黑色素瘤细胞B16

YS4439C人子宫内膜癌细胞；RL95-2

YS4440C大鼠肝星形细胞HSC-T6

YS4441C人肺成纤维细胞HFL-1

YS4442C脑星形细胞瘤SW1088

YS4443C肝癌细胞SNU878

YS4444C肝癌细胞SNU423

YS4445C胰腺腺癌细胞Panc03.27

YS4446C人脑髓母细胞瘤细胞D283 Med

YS4447C非洲绿猴肾成纤维细胞（SV40转化）COS7

YS4448C小鼠肝癌细胞H22

YS4449C乳腺癌细胞HCC1187

YS4450C小鼠黑色素瘤细胞B16F0

YS4451C小鼠单核巨噬细胞J774A.1

YS4452C人骨髓基质细胞HS-5

YS4453C人非小细胞肺癌细胞系NCI-H322

YS4454C人胆管癌细胞HUH-28

YS4455C颌下腺鳞癌细胞A253

YS4456C嗜酸性粒细胞白血病细胞株EOL-1

YS4457C骨髓细胞系IDG-SW3

YS4458C人卵巢畸胎瘤细胞 PA-1

YS4459C人肾透明细胞癌Caki-1

YS4460C急性早幼粒细胞株NB4

YS4461C人卵巢癌细胞UWB1.289

YS4462C人食道癌肿瘤细胞TE10

YS4463C肺癌细胞（混合）HCC2279

YS4464C急变期慢性粒细胞白血病LAMA84

YS4465C乳腺原发性导管癌HCC1599

YS4466C结肠癌细胞细胞GP2d

YS4467C小鼠肝癌细胞Hepa1c1c7

YS4468C急性单核细胞白血病细胞MonoMac6

YS4469C大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6

YS4470C人皮肤黑色素瘤细胞SK-MEL-1

YS4471C人甲状腺髓样癌细胞TT

YS4472C急性髓系白血病OCI-AML-2

YS4473C急性髓细胞白血病OCI-AML-5

YS4474C人乳腺癌细胞MDA-MB-157

YS4475C乳腺癌细胞HCC1569

YS4476C人食管癌细胞TE-1

YS4477C人宫颈癌肠转移细胞Ca Ski

YS4478C大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12低分化

YS4479C大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（未分化）PC-12

YS4480C舌头鳞癌细胞UPCISCC090

YS4481C金仓鼠肾成纤维细胞BHK21

YS4482C人肾癌细胞A498

YS4483C人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H2087

YS4484C小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3

YS4485C人肺鳞癌细胞NCI-H2170

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