细胞名称：Hs888Lu人肺成纤维细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5ml培养基,放入37℃、5%CO2孵

箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,

1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%ydbm消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞

消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液

,补加1-2mL培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细

胞培养箱中培养。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例

分到新的含8ml培养基的新瓶中。

方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基新瓶

中。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml培养液终止消化,再轻

轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上

再转入液氮罐中。C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

收到货后处理：

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后

放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处

理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售

后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进

行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的STR鉴定可向客服咨询索取。

YS1078P小鼠卵巢颗粒原代细胞

YS1079P小鼠子宫颈上皮原代细胞

YS1080P小鼠子宫平滑肌原代细胞

YS1081P小鼠卵巢上皮原代细胞

YS1082P小鼠子宫成纤维原代细胞

YS1083P小鼠卵巢成纤维原代细胞

YS1084P小鼠肾实质原代细胞

YS1085P小鼠膀胱平滑肌原代细胞

YS1086P小鼠肾小管上皮原代细胞

YS1087P小鼠肾小球内皮原代细胞

YS1088P小鼠前列腺上皮原代细胞

YS1089P小鼠肾皮质上皮原代细胞

YS1090P小鼠膀胱成纤维原代细胞

YS1091P小鼠肾足突原代细胞

YS1092P小鼠肾成纤维原代细胞

YS1093P小鼠尿道上皮原代细胞

YS1094P小鼠输尿管上皮原代细胞

YS1095P小鼠心肌原代细胞

YS1096P小鼠心肌成纤维原代细胞

YS1097P小鼠主动脉内皮原代细胞

YS1098P小鼠主动脉平滑肌原代细胞

YS1099P小鼠血管外膜成纤维原代细胞

YS1100P小鼠大隐静脉平滑肌原代细胞

YS1101P小鼠冠状动脉平滑肌原代细胞

YS1102P小鼠大隐静脉内皮原代细胞

YS1103P小鼠冠状动脉内皮原代细胞

YS1104P小鼠滑膜原代细胞

YS1105P小鼠骨骼肌原代细胞

YS1106P小鼠真皮成纤维原代细胞

YS1107P小鼠软骨原代细胞

YS1108P小鼠破骨原代细胞

YS1109P小鼠前脂肪原代细胞

YS1110P小鼠成骨原代细胞

YS1111P小鼠关节软骨原代细胞

YS1112P小鼠表皮角质形成原代细胞

YS1113P小鼠脑膜原代细胞

YS1114P小鼠海马神经元原代细胞

YS1115P小鼠脑微血管内皮原代细胞

YS1116P小鼠脑成纤维原代细胞

YS1117P小鼠神经小胶质原代细胞

YS1118P小鼠小脑颗粒原代细胞

YS1119P小鼠嗅鞘原代细胞

YS1120P小鼠视网膜Muller原代细胞

YS1121P小鼠视网膜神经节原代细胞

YS1122P小鼠角膜成纤维原代细胞

更多细胞欢迎咨询我们：Hs888Lu人肺成纤维细胞ATCC