MatTek组织模型全厚度黑素瘤MatTekA3754

MatTek组织模型全厚度黑素瘤MatTekA3754

黑色素瘤模型由人类恶性黑色素瘤细胞（A375），正常的人源性表皮角质形成细胞（NHEK）和正常的人源性皮肤成纤维细胞（NHDF）组成，已培养形成多层，高度分化的表皮，黑色素瘤细胞位于CM恶性肿瘤的各个阶段。在培养的不同阶段，组织表现出放射状生长期（RGP），垂直生长期（VGP）或转移性黑素瘤表型。使用无血清培养基在细胞培养插入物上培养细胞，并在体外皮肤技术的前沿达到分化水平。从结构上讲，黑色素瘤模型与体内黑色素瘤的进展密切相关，从而为研究，了解和开发针对严重的皮肤恶性肿瘤之一的预防和治疗方法提供了有价值的工具。

黑色素瘤模型表现出均匀且高度可重复的体内样形态和生长特征。这种全厚度皮肤模型的表皮由类似于体内发现的有组织的基底，棘突，颗粒状和角质化表皮层组成。真皮隔室由胶原蛋白基质组成，该胶原蛋白基质含有活的正常人真皮成纤维细胞（NHDF）。

使用黑色素瘤组织的方案清晰明了。MatTek的黑色素瘤组织已与多种靶向和抗黑色素瘤药物一起使用。全厚度黑色素瘤皮肤模型中的人类转移性黑色素瘤细胞（A375）。A375细胞在真皮/表皮连接处发展为RGP黑色素瘤（第11天）。随着培养时间的延长，黑色素瘤淋巴结呈VGP形态（第18天），随后分离出的细胞簇侵入真皮（转移性侵袭）（第29天）。长箭头表示在表皮-真皮连接处的黑色素瘤细胞簇。短箭头显示渗透到真皮的分离的黑色素瘤细胞团。

全层皮肤黑色素瘤模型（MLNM-FT-A375）的透射电子显微照片（TEM）。A.黑色素瘤细胞（M）和角质形成细胞（KC）的相互作用区域。B.黑色素瘤细胞与下面的真皮基质相互作用的区域（D）。N，核，n，核仁。箭头表示凋亡的黑色素瘤细胞

包含转移性SK-Mel-28细胞的全层皮肤黑色素瘤模型（MLNM-FT）。S-100抗体染色。初，黑色素瘤细胞的小巢在真皮/表皮连接处形成（第11天）。后来出现VGP肿瘤（第25天），随后观察到转移到真皮中（第29天）。长箭头表示在表皮-真皮连接处的一些黑色素瘤细胞簇。短箭头显示单个黑色素瘤细胞浸润真皮。

N-钙黏着蛋白粘附分子在MLNM-FT-A375全厚度黑色素瘤皮肤模型中的表达。N-钙黏着蛋白抗体染色，40X。注意随着时间的流逝，N-钙黏着蛋白表达水平增加。

组织：

试剂盒：全厚度黑素瘤皮肤构建物（MLNM-FT-A375试剂盒）由24个组织组成。（组织“套件”包含组织，少量培养基和塑料制品；有关特定套件的内容，请与MatTek联系。）

底物：使用单孔组织培养板插入物（例如Millicell CM单孔组织培养板插入物，孔径= 0.4 µm，表面积= 0.6 cm2）。

文化：初被淹没，然后进入气液界面。

组织学：上皮：8-12个上皮细胞层加上角质层（基底层，棘层和颗粒层）；真皮：含有成纤维细胞的胶原蛋白凝胶。在早期阶段，黑素瘤细胞在真皮/表皮连接处形成淋巴结。在后期，黑素瘤发展为RGP（放射状生长期），VGP（垂直生长期）并连续侵袭皮肤成分。

批号：每周生产的薄纸批被分配一个特定的批号。批号的末尾附加一个字母，以区分给定批组织中的各个试剂盒。批次内的所有组织试剂盒在细胞，培养基，处理，培养条件等方面都是相同的。

装运：将组织在4摄氏度下在6孔板中的中等添加琼脂糖凝胶上运输。

发货日：星期一。如有特殊要求，也可以在周四发货。

交货时间：周二上午，通过FedEx优先服务（美国）。美国以外地区：星期二至星期四，具体取决于位置。

保质期：包括运输时间在内，在使用前，可将组织在4°C下多保存3天。但是，除非有必要，否则不建议延长存储时间。此外，如果在同一天（例如，星期二下午或在4°C下过夜存储（星期三早晨）??）一致使用薄页纸，则可获可重复性。

实验时间：对于黑色素瘤的发生和发展，可以持续长达4周的培养，并且保留了正常的表皮形态。必须每隔一天使用MatTek培养台（MEL-STND；点击此链接查看照片）以及5.0毫升MLNM-FT-MM进行培养。

替代纸巾：

MLNM-FT-A375（第6天）：早期MLNM-FT-A375组织。尚未在气液界面上培养组织。客户收到所需的媒体（MLNM-FT-GM）以继续培养并生产MLNM-FT-A375。由于该产品的专有性，在订购前需要与MatTek技术代表进行讨论。专为研究黑色素瘤发展的早期阶段而设计，其中实验设计指示了早期组织的使用。

MLNM-FT-EXP：与MLMN-FT-A375相同，只是MatTek用客户提供的黑色素瘤细胞替代了A375细胞。

细胞：

类型：人黑素瘤细胞（A375）；正常人表皮角质形成细胞（NHEK）；正常人皮肤成纤维细胞（NHDF）。

来源：恶性黑色素瘤细胞系（A375）；新生儿包皮组织（NHEK）；新生儿皮肤（NHDF）；

替代品：人恶性黑色素瘤细胞SK-Mel-28。

筛查： HIV，乙型肝炎，丙型肝炎，支原体。

介质：

基本培养基： MCDB 153基本培养基。

生长因子/激素：表皮生长因子，胰岛素，和其他专有的表皮分化刺激剂。

血清：无。

抗生素：庆大霉素5 µg / ml（庆大霉素正常水平的10％）。

抗真菌剂：两性霉素B 0.25 µg / ml。

pH指示剂：酚红（0.0012 g / l）。

其他添加剂：用于增强表皮屏障形成的脂质前体（专有）。

分析/维护介质： MLNM-FT-MM用于MLNM-FT-A375组织的分析以及长期维护。

质量控制和无菌性：

目视检查：目视检查所有薄页纸，如果发现物理缺陷，则拒绝运送薄纸。

终用途测试：将生产批次的组织保留下来，再培养7天，进行组织学固定和分析。

无菌：检查整个生产过程中使用的所有介质的无菌性。将维持培养基在有或没有抗生素的情况下孵育1周，并检查其无菌性?；菇糜谠耸涞?4孔板的琼脂糖凝胶孵育1周，并检查是否有任何污染迹象。

病原体筛查：使用PCR对所有细胞进行筛查，并对HIV，乙型肝炎和丙型肝炎呈阴性。但是，没有已知的测试方法可以*保证细胞不含病原体。因此，应按照CDC-NIH手册“微生物和生物医学实验室的生物安全性”（1998年）中的建议，将这些产品和所有人类衍生产品的处理水平定为BSL-2级（生物安全级2级）或更高。有关更多帮助，请联系您的站点安全员或MatTek技术服务。

批次失败的通知：如果薄纸批次未通过我们的质量控制或无菌测试，则将通知客户，并在适当时免费更换薄纸。由于我们的质量控制和无菌测试是在装运后进行的，因此将尽快进行通知（在正常情况下，无菌故障将在装运后的8天内通知）。