細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞的培養(yǎng)。

上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系          500 ml

產(chǎn)品主要成分

上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基                     440 ml  

上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑                     5 ml 

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)試劑盒 96T/48T

Human aldosterone (ALD) ELISA Kit 人固酮(ALD)試劑盒

Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit 人胰島淀粉樣多肽(IAPP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAndrogenBindingProtein,ABP試劑盒人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物二酚氧化酶(diphenolase)活性比色法定量試劑盒20次

MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit猴載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠細(xì)胞周期素D1(CCND1)試劑盒 ，英文名： CCND1 ELISA Kit

Mouse three iodothyronine (T3) ELISA Kit 小鼠三甲狀腺原(T3)試劑盒

MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 小鼠S100蛋白(S-100)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHSVII-Ab(HumanHerpessimplexvirusIIaibody)ELISAKit人單皰疹病毒Ⅱ型抗體

細(xì)胞IKKβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitLTE4大鼠白三烯E4

胃泌素   英文名稱：   Gasin   規(guī)格：      英文縮寫：   G

心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA3   英文名稱：   cardiac muscle anscription factor GATA3   規(guī)格：      英文縮寫：   GATA3

心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4   英文名稱：   cardiac muscle anscription factor GATA4   規(guī)格：      英文縮寫：   GATA4

粒細(xì)胞趨化蛋白-2   英文名稱：   neuophilicgranulocyte chemokines Protein 2   規(guī)格：      英文縮寫：   GCP-2

細(xì)胞分化蛋白SEPT10抗體

FAM90A27P抗體

EPCAM重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白  Protein

Gentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白

SPEG重組人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白

ECM1 Protein Mouse 重組小鼠 ECM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

雞腎小管上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基血管性血友病因子(vWF)重組蛋白 Recombinant Von Willebrand Factor (vWF)

CD74 Protein Human 重組人 CD74 蛋白

LEFTY2重組人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GAG-P24 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein