BY-0528 MDBK牛肾细胞系
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- 公司名称 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型号 BY-0528
- 产地
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2025/8/5 10:48:01
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MDBK牛肾细胞系
在哺乳动物细胞模型中，MDBK牛肾细胞系以其独te的肾脏上皮细胞特性，成为牛源病毒研究、疫苗生产及生物制品开发的关键模型。与禽类的 DF-1 细胞系不同，该细胞系源自牛肾脏组织，在反刍动物病毒宿主 - 病原体相互作用研究中展现出不可替代的价值。
细胞起源与生物学特性
MDBK 细胞系建立于 20 世纪 50 年代，源自新生犊牛的肾脏皮质组织，通过原代消化培养获得永生化细胞系（未经过外源性永生化基因转染）。这一特性使其保留了原代牛肾上皮细胞的生物学特征，同时具备稳定的传代能力（连续传代超过 300 次仍保持典型表型），解决了原代牛肾细胞传代受限（仅 10-15 代）的问题，成为牛肾细胞研究的标准化工具。
细胞形态呈典型的上皮样，多为多边形或立方形，排列紧密呈铺路石状，细胞核呈圆形或椭圆形（核质比约 1:3.5），较 DF-1 细胞更为规则。在培养特性上，MDBK 对营养条件要求适中，最适体系为含 10% 胎牛血清的 MEM 培养基（添加 1% 双抗），在 37℃、5% CO?环境下贴壁生长，倍增时间约 24-28 小时（略长于 DF-1 的 22-24 小时）。细胞融合度达 80%-90% 时需传代，推荐比例 1:3，过度密集会导致细胞形态改变（上皮标志物表达下降 15%）。
功能鉴定显示，MDBK 高表达肾上皮细胞标志物细胞角蛋白 18（CK18，98% 阳性）、钠钾 ATP 酶（97% 阳性），低表达成纤维细胞标志物波形蛋白（＜5%），且无支原体及内源性病毒污染（经多次检测验证），这一特性使其成为生物安全级疫苗生产的优质细胞基质。
核心应用领域
牛源病毒培养与分离
MDBK 对牛源病毒具有高度敏感性，是牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、牛疱疹病毒 1 型（BoHV-1）、牛腺病毒等的理想宿主细胞。与原代牛肾细胞相比，该细胞系可通过空斑实验精确测定病毒滴度（如 BVDV 滴度可达 10???PFU/mL），且能稳定传代病毒超过 20 次（原代细胞仅能传代 8-10 次）。研究显示，MDBK 感染 BVDV 后，72 小时内即可观察到明显的细胞病变（CPE），表现为细胞圆缩、脱落（病变率达 90%），而 DF-1 等禽类细胞对牛源病毒几乎无敏感性。
牛用疫苗研发与生产
作为国ji公ren的牛用疫苗生产细胞系，MDBK 已广泛应用于灭活疫苗与弱毒疫苗研发。在牛病毒性腹泻疫苗生产中，该细胞系的病毒增殖效率是其他牛源细胞的 2.5 倍，且表达的病毒 E2 蛋白活性更高（中和效价达 1:256）。2022 年某牛疱疹病毒疫苗通过 MDBK 细胞培养实现规?；?，疫苗效价较原代细胞培养提升 35%，生产成本降低 20%。
病毒致病机制研究
MDBK 的上皮细胞特性使其成为研究病毒入侵机制的理想模型。通过 CRISPR/Cas9 技术敲除 BVDV 受体 CD46 基因后，细胞对 BVDV 的敏感性下降 80%（病毒滴度从 10???降至 10??2），证实 CD46 在病毒入侵中的关键作用。此外，该细胞系可高效表达外源基因（转染效率达 55%），常用于牛源病毒蛋白的表达与功能研究（如 BoHV-1 的 gB 蛋白产量达 12mg/L）。
优势与局限性
与其他牛源细胞系相比，MDBK 的核心优势在于：1）无内源性病毒污染，生物安全性高；2）对多种牛源病毒敏感性强，适用范围广；3）培养条件简单，易于大规模培养。其局限性在于对非牛源病毒敏感性较低（如猪瘟病毒在该细胞中增殖能力弱），且长期传代（＞200 次）可能出现部分功能衰退（病毒增殖效率下降 10%-15%）。
研究意义与展望
MDBK 牛肾细胞系的建立，推动了牛源病毒学研究从原代细胞向标准化细胞系的转变。与 DF-1 等禽类细胞系不同，MDBK 以其对牛源病毒的高度特异性，成为反刍动物疫病研究的 “专用工具”。未来，通过基因编辑技术改造 MDBK（如敲除病毒抑制因子基因），有望提高病毒增殖效率；结合悬浮培养技术，可进一步提升疫苗生产规模（初步实验显示悬浮培养的病毒产量是贴壁培养的 1.8 倍）。作为牛源细胞模型的典fan，MDBK 正为牛疫病防控与畜牧业健康发展提供重要技术支撑。
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