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Auvon细菌计数板准备:
准备细菌计数使用前,磨光的表面小心地用擦镜纸擦干净。盖玻片也要擦干净。
在需要盖的周边区域需要用蒸馏水弄得微湿后,然后盖玻片要慢慢的从计数板的前端推入,直到盖玻片的前端边缘与计数板的划格子的区域处于同位。
在外部支持和盖玻片之间的干扰线(牛顿环)的组成显示了盖玻片的准确位置。
由于细菌计数板较薄,1mm厚度,可以使用油镜观察。当然使用时请当心,小心易碎。盖玻片也是易碎的,可以另外单独购买。
Auvon细菌计数板加样:
取一个良好混合型的吸管并且放置一些初期的几滴液体。把吸管的外部擦干,然后保持吸管一定的角度直到小滴液体被吸管吸上去。然后这滴液体被放置在盖玻片和计数板之间。由于盖玻片和计数板之间的毛细管现象作用的结果,两个平面之间的缝隙被灌满。在溶液要满出计数板截面的边缘之前,移走吸管的。如果有可见气泡或者液体已经满出边缘并且进入其他的沟里,那么计数板就要擦干净并且重新加样。
装载好的计数板被放置在显微镜台上。显微镜的照明是重要的,太亮了会影响划格线的观察。光可以通过虹膜光圈减弱直到划得格子在背景中再次清晰可见。细胞/质粒的计数应该充分稀释到他们不再互相重叠,并且均匀的分配。
要完成计数检测需要扩大到期望的可见的细胞/质粒。细胞数量的计算推荐计数100方格作为排除少量的结果。
计数格在过划线区域使用时需要均匀的分配,并且这个通过藉由三倍之数决定的方格支架在进入区段之内。
计数完100方格后总数除100(计数的方格数),来得到每格的平均值。乘稀释度,除1/4000(每个小方格的立方容积1/20 x 1/20 x 1/10 = 1/4000mm3)。这次计算得到的数字是原非稀释流质的每立方毫米的细胞数量


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