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岛津18AA氨基酸分析包-岛津氨基酸分析包

2025-07-02

产      地:
岛津
所在地区:
天津天津市
有效期还剩 153举报该信息

柱前衍生同时分析18种氨基酸

详询:天津谱祥科技-刘工    


样品信息:
18种氨基酸 出峰顺序依次为1--天冬氨酸ASP、2--谷氨酸GLU、3--丝氨酸SER、4--谷氨酰胺Gln、5--组氨酸HIS、6--甘氨酸GLY、7--苏氨酸THR、8--瓜氨酸CIT、9--精氨酸ARG、10--丙氨酸ALA、11--色氨酸TYR、12--半胱氨酸CYSTINE、13--缬氨酸VAL、14--蛋氨酸MET、15--苯丙氨酸PHE、16--异亮氨酸ILE、17-亮氨酸LEU、18--赖氨酸LYS

检测目的:在线柱前衍生分析18种氨基酸

检测原理:
岛津prominence 20A UFLC系统升级后,可以在定量环内实现柱前在线衍生。
衍生时,进样针首先吸取硼酸buffer到定量环(硼酸buffer pH值7.0,在碱性条件下衍生效果更好)----再吸取OPA和3-巯基丙酸的混合液(OPA衍生一级胺,3-巯基丙酸?;ぐ被幔?---再吸取FMOC(FMOC衍生二级胺)----zui后吸取氨基酸标准品溶液---混合充分反应,进样分析。

检测方法:标准品储备液,稀释后衍生进样分析

分析仪器:岛津prominence 20A UFLC系统

液相色谱条件:

色谱柱:Inertsil ODS-4 3um 4.6*150mm 货号:5020-04045
流动相:A:水(40mM磷酸盐,Ph7.0) B:乙腈/甲醇/水=45:45:10
流速:1.0ml/min
柱温:40℃
检测器:UV,262nm、338nm
进样量:1ul
衍生剂配制方法:
OPA配制:10mgOPA溶于1ml溶液(0.16ml甲醇+0.14ml硼酸缓冲液+0.7ml纯水)
3-巯基丙酸:10ul 3-巯基丙酸用纯水稀释至1ml
硼酸缓冲液:0.1mol/L,用0.4mol/L的氢氧化钠调节pH值至10
FMOC:10mgFMOC溶于1ml乙腈
梯度条件,见表1:


表1 梯度条件
time(min)ModuleCommandValue
2.5pumpspump B Conc13
2.51pumpspump B Conc15
10pumpspump B Conc16
15pumpspump B Conc35
26pumpspump B Conc42
26.01pumpspump B Conc100
29.5pumpspump B Conc100
29.51pumpspump B Conc12
35controllerstop


图谱如下:

图谱1


重现性:

表3 保留时间与峰面积重现性结果(浓度为2 umol/L,n=6)
峰号RSD%(RT)RSD%(Area)
10.161.84
20.052.18
30.10.72
40.090.70
50.081.09
60.091.07
70.090.73
80.10.85
90.11.03
100.060.66
110.040.87
120.060.88
130.060.65
140.070.97
150.090.86
160.050.67
170.090.77
180.110.93

图2 保留时间与峰面积重现性图谱


另外 提供氨基酸检测分析方案及全套设备,分析设备。


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