小鼠骨髓瘤細胞系，Sp2/0細胞

培養(yǎng)細胞生長減慢
可能原因
（1）由于更換不同培養(yǎng)液或血清
（2）培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。
（3）培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染
（4）試劑保存不當
（5）接種細胞起始濃度太低
（6）細胞已老化
（7）支原體污染
建議解決方法
（1）比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液。
（2）換入新鮮配制培養(yǎng)液，或補加谷氨酰胺及生長因子。
（3）用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，丟棄培養(yǎng)物?；蛴每股爻?。
（4）血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2－8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2-8℃保存，并在2 周內(nèi)用完。
（5）增加接種細胞起始濃度。
（6）換用新的保種細胞。
（7）分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。
培養(yǎng)細胞死亡
可能原因
（1）培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2
（2）培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大
（3）細胞凍存或復蘇過程中損傷
（4）培養(yǎng)液滲透壓不正確
（5）培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積
（6）更多原因參考問題4和問題7
建議解決方法
（1）檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2
（2）檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度
（3）取新的保存細胞種
（4）檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意：大多數(shù)哺乳動物細胞能耐受滲透壓為260 – 350 mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓。
（5）換入新鮮培養(yǎng)液
（6）更多解決方法參考問題4和問題7