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IPEC-J2 豬小腸上皮細(xì)胞永生化

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更新時間:2024-01-05 09:55:56瀏覽次數(shù):470次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10^6
貨號 BH1377 主要用途 僅供科研使用
IPEC-J2 豬小腸上皮細(xì)胞永生化
細(xì)胞鑒定: 免疫熒光鑒定已通過

細(xì)胞來源: 國內(nèi)建系

細(xì)胞背景 :小腸黏膜,小腸的管壁分為黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜四層。小腸黏膜是最靠近管腔的 一層。由上皮、固有層和黏膜肌層組成。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶 SV40 基因

l細(xì)胞特性 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長

用途:僅供科研使用。

IPEC-J2 豬小腸上皮細(xì)胞永生化

細(xì)胞鑒定 免疫熒光鑒定已通過

細(xì)胞來源 國內(nèi)建系

細(xì)胞背景 :小腸黏膜,小腸的管壁分為黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜四層。小腸黏膜是最靠近管腔的 一層。由上皮、固有層和黏膜肌層組成。上皮和固有層向腸腔突起形成腸絨毛,上皮向固有 層凹陷形成小腸腺。小腸黏膜的上皮為單層柱狀上皮,由吸收細(xì)胞、杯狀細(xì)胞和少量內(nèi)分泌 細(xì)胞組成。小腸腺除上述細(xì)胞外,還有潘氏細(xì)胞和干細(xì)胞。吸收細(xì)胞主要功能是消化吸收, 此外也參與分泌性免疫球蛋白 的釋放。杯狀細(xì)胞分泌黏液,有滑和保護(hù)作用。潘氏細(xì)胞 分泌防御素、,對腸道微生物有殺滅作用。內(nèi)分泌細(xì)胞種類多,所分泌的激素參與調(diào) 控胃腸活動。干細(xì)胞增殖、分化,補充脫落的上皮細(xì)胞。固有層的結(jié)締組織含有大量小腸腺, 以及豐富的淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞。黏膜肌層由內(nèi)環(huán)形和 外縱行兩薄層平滑肌組成。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶 SV40 基因

l細(xì)胞特性 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長

用途:僅供科研使用。

IPEC-J2 豬小腸上皮細(xì)胞永生化

 培養(yǎng)條件 1)準(zhǔn)備上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37 攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。

注意事項 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加入 0.25%(

w / v-0.53 mM EDTA 于培養(yǎng)瓶中(

T25 瓶 1-2mL,T75 瓶 2-3mL),

置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下

觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入 3-4ml

 10%FBS 的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 3-5min,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

將細(xì)胞懸液按 1的比例分到新 T25 瓶中,添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)

基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按 1:2~1:5 的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前 代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

4)運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 T25 培養(yǎng)瓶 1傳代 。

 運輸形式 低溫:1mL 凍存管包裝干冰運輸,收到后-80 度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)

干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

常溫: T25 瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

生物安全 1. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),

所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意:凍存管浸沒在液

氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹

掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。


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