1. 報告結(jié)果中提示的多等位基因結(jié)果是什么？

答：正常的人源細胞組織細胞其STR圖譜，一個基因位點僅出現(xiàn)一個或2個峰。如發(fā)生細胞交叉污染現(xiàn)象，基因位點會出現(xiàn)多等位基因，即一個基因位點出現(xiàn)3個或以上峰?？紤]到微衛(wèi)星的不穩(wěn)定，也不排除細胞突變的情況。

2. 細胞匹配的判讀標(biāo)準(zhǔn)是什么，怎么通過結(jié)果大致分析是否存在交叉污染？

答：參考ATCC-ANSI細胞鑒定標(biāo)準(zhǔn)，檢測細胞和已公布的數(shù)據(jù)比對，匹配度低于0.8則判定細胞和目標(biāo)細胞系不匹配。匹配度在0.8-1.0之間，判定細胞基本匹配，可能存在交叉污染或者傳代代次過高導(dǎo)致的細胞質(zhì)量下滑，位點突變的情況。

需注意，當(dāng)出現(xiàn)3個及以上多等位基因結(jié)果時，需進一步參考數(shù)據(jù)庫排查是否存在 叉污染。匹配度為1.0則樣本和目標(biāo)細胞匹配，且細胞質(zhì)量較好。

3. 目前小鼠細胞的STR鑒定是否可以做？

答：目前除部分公布的小鼠細胞位點數(shù)據(jù)外，還采取自行收錄標(biāo)準(zhǔn)樣本的方式整合小鼠細胞數(shù)據(jù)庫，市面上常見的小鼠細胞系結(jié)果均可進行鑒定。部分少見細胞系，需要通過定向數(shù)據(jù)比對的方式來確定來源。

4. 什么是 STR？細胞系鑒定原理簡單描述？STR 檢測結(jié)果里邊的數(shù)字是什么意思？

 答：STR:基因上的短串聯(lián)重復(fù)序列分子標(biāo)記（ATATATATATATAT，數(shù)字代表段串聯(lián)序列重復(fù)次數(shù)）。每一株構(gòu)建的細胞系都有一組特異性的 STR 數(shù)據(jù)與之對應(yīng)，細胞系是否正確，檢測該樣本的 STR 與數(shù)據(jù)庫對應(yīng)的細胞系 STR 比對是否一致即可。一旦細胞系的遺傳特性被確立，細胞系就應(yīng)該定期的檢測，以防止出現(xiàn)細胞系被誤認(rèn)或交叉污染的情況。

5. 什么時候需細胞系鑒定？

1、發(fā)表文章或申請課題經(jīng)費前；

2、使用細胞進行臨床治療（試驗）前；

3、準(zhǔn)備凍存保種或已凍存多年的細胞；

4、一個涉及到細胞試驗項目開始/結(jié)束時；

5、新得到的細胞或?qū)嶒炇遗囵B(yǎng) 5 代以上的細胞；

6、細胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大；細胞功能不正常；

7，實驗室新建立的細胞系；

6 ，所鑒定的細胞系數(shù)據(jù)庫沒有 STR 數(shù)據(jù)參考怎么辦？為什么會無匹配？原代細胞能夠做細胞鑒定嗎?

答：出現(xiàn)匹配不上任何已知數(shù)據(jù)情況，是因為這株細胞的標(biāo)準(zhǔn)序列并沒有收錄在國際的細胞庫之中，導(dǎo)致送檢樣本與任何的序列都不匹，或者樣本是自主構(gòu)建的新細胞系。沒有對比數(shù)據(jù)的，按說也要檢測一下 STR，只要做出來 str 數(shù)據(jù)跟數(shù)據(jù)庫排查，如果最后無匹配結(jié)果，問題不大，如果跟其他細胞匹配上 比如跟 hela 匹配上就有問題。原代細胞亦可做細胞系 STR 鑒定，一方面將其 STR 與數(shù)據(jù)庫做個排查。原代細胞鑒定需客戶提供原始組織和原代細胞，成組檢測，以原始組織的 STR 分型結(jié)果作為標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)進行比對。

7. 細胞鑒定已公布的數(shù)據(jù)來源？

答：DSMZ 數(shù)據(jù)庫，是整合4個國際數(shù)據(jù)庫：美國ATCC、德國DSMZ、日本JCRB和RIKEN，Expasy數(shù)據(jù)庫輔助判斷。

8. 細胞鑒定STR體系涵蓋多少個位點？

答：國際金標(biāo)準(zhǔn)8個STR和1個性別鑒定位點，更額外贈送12個STR位點輔助判斷。

9. 細胞鑒定STR體系是否能應(yīng)用于干細胞存儲領(lǐng)域？

答：細胞鑒定是一種司法親子鑒定技術(shù)，不僅可以鑒定商品化的細胞株，還能應(yīng)用于干細胞來源性輔助鑒定。入庫細胞和對應(yīng)干細胞存儲者來源是否一致，也可通過細胞鑒定來實現(xiàn)。

10. 細胞鑒定STR能否分辨轉(zhuǎn)染細胞株的成功率和挑選轉(zhuǎn)染細胞株？

答：目前測試下來，轉(zhuǎn)染和基因改造的細胞系，STR結(jié)果基本一致，匹配度大概在0.9-1.0之間，僅通過STR的方法還是沒辦法做篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的目的，建議是通過WB和基金測序，單克隆挑選來篩選想要的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株。